Kaksikahelalise RNAi lõikamine RNaas III perekonna endoribonukleaasiga. dsRNA-st ja mRNA-st tekivad lühikesed kaksikahelalised RNA-fragmendid, e. siRNA-d. Dicer-ensüüm reguleerib vaid normaalsete rakkude arengut ja diferentseerumist ning mutatsioonid geenis võivad põhjustada seetõttu kasvajaliste rakkude teket. Vt. Dicer-ensüüm.